溫度是影響氣相色譜分離度的重要參數(shù)之一，在詳細(xì)講解之前，我們先來看一下分離度方程：

左邊的Rs代表分離度，右邊的N代表柱效，α代表選擇性，K代表選擇因子。

                                                                                            保留因子

對于化合物保留，一般來說，溫度降低，保留增強(qiáng)，溫度升高，保留變?nèi)酢?/p>

柱溫每上升30度，保留時間降低50％。

                                                                                            選擇性

對于選擇性α，降低溫度，可以優(yōu)化分離度。

                                                                                            柱效

另外，溫度還在一定程度上影響到柱效，溫度升高時，出峰變快，峰展寬變小，柱效也就升高。

氣相色譜方法又分為恒溫方法和程序升溫方法。

                                                                                            恒溫方法

在恒溫方法中，色譜柱的溫度保持不變。

它對于沸點差異不大，保留性質(zhì)差不多的化合物組比較有效。

但是，當(dāng)要分析的物質(zhì)保留性質(zhì)差異較大時，較晚出的色譜峰就會出現(xiàn)峰展寬、峰型變差、靈敏度降低等各種問題。

而較早出的色譜峰又很難達(dá)到滿意的分離度，這時候我們就需要用程序升溫方法了。

                                                                                            程序升溫法

在程序升溫的方法中，柱溫起始溫度較低，讓較早出的色譜峰實現(xiàn)比較好的分離。

接下來溫度上升，并在較高溫度下保持一段時間，可以讓后出的色譜峰整體前移，縮短分析時間。

這樣保留較強(qiáng)的化合物出峰提前，實現(xiàn)更窄的峰寬和更高的靈敏度。

                                                                                            如何設(shè)置和優(yōu)化程序升溫條件

一般采用上面這個標(biāo)準(zhǔn)的測試升溫梯度，做為條件優(yōu)化的起始：

測試升溫梯度

1、初始溫度盡量低，比實驗室室溫高15度就可以了。

2、然后，以每分鐘10度的速度升溫。

3、后在色譜柱耐受溫度以下20度左右停留10分鐘，觀察所有進(jìn)樣的化合物都能夠以不錯的分離度全部跑出色譜柱。

4、然后根據(jù)得到的色譜圖對條件進(jìn)行進(jìn)一步的優(yōu)化。

                                                                                            升溫方法選擇

如果所有峰出峰時間的“窗口”小于程序升溫時間1/4，那這個方法就可能考慮采用恒溫方法。

建議恒溫溫度比個峰的出峰溫度低45度，接下來可以以10度左右上下調(diào)整，以得到分離度。

如果所有峰出峰時間的“窗口”大于程序升溫時間1/4，或者恒溫分析無法獲得滿意的分離度，那就需要采用程序升溫的方法。

                                                                                            初始溫度設(shè)定

對于不分流進(jìn)樣來說，初始柱溫通常設(shè)定的比溶劑沸點低10到20度，保持1分鐘。

因為在不分流模式下，襯管中的氣體流速很小，樣品需要較長的時間才能跑到色譜柱里，因此，需要使用較低的初始柱溫，利用溶劑聚焦來獲取更窄的峰寬。

對于分流進(jìn)樣，襯管里的載氣流速很快，樣品幾秒鐘內(nèi)就會從襯管轉(zhuǎn)移到色譜柱。所以從樣品聚焦的角度，對初始溫度沒有特別的要求。

有時候可以稍微降低初始溫度和延長保持時間，來改善靠前出的峰的分離度。

                                                                                            升溫速率設(shè)定

其次，是升溫速率的設(shè)定，它對靠中間出的峰的分離度有巨大的影響。

一般來說，升溫速率越快，出峰越快，分析時間越短，但是會降低峰的分離度。

所以這是一個效率和效果的博弈，我們期望用短的分析時間，達(dá)到滿意的分離度。

一般來說，推薦的升溫速率可以用這個公式來計算：

這里的T0為死時間，就是不保留的化合物在色譜柱上的出峰時間。

                                                                                            恒溫平臺設(shè)定

如果用同一個升溫速率，中間有些峰仍然無法實現(xiàn)很好分離的話，可以在這些峰出峰溫度以下45度左右設(shè)置一個恒溫平臺，保持2到5分鐘后繼續(xù)升溫，這樣能夠?qū)崿F(xiàn)更好的分離。

對于復(fù)雜的樣品，可能需要設(shè)置多個升溫的平臺，才能實現(xiàn)化的分離。

                                                                                            結(jié)束溫度設(shè)定

后是結(jié)束溫度的設(shè)定。升溫的溫度一般設(shè)置為個色譜峰出峰溫度以上20度左右。

但是對于有些復(fù)雜基質(zhì)的化合物分析，我們會把程序升溫的結(jié)束溫度設(shè)定的更高一些，對色譜柱進(jìn)行一段時間的烘烤，防止有些高沸點的化合物在色譜柱中殘留，影響后續(xù)的檢測。

但是要注意不能超過色譜柱的耐受溫度哦。

文章來源：色譜學(xué)堂