使用氣相色譜儀的十個好習(xí)慣
1、遇到保留時間,重復(fù)性,靈敏度相關(guān)的問題,先想到進(jìn)樣口檢漏
氣相色譜中的任何泄漏都會導(dǎo)致我們說的這三個問題,進(jìn)樣口是容易有漏的區(qū)域,因此進(jìn)樣口的檢漏非常有必要。
如何避免進(jìn)樣口泄露有幾點需要注意的地方:
(1)及時更換隔墊和襯管的橡膠密封圈;
(2)接柱子的石墨密封墊也是導(dǎo)致漏的一個地方;
(3)對進(jìn)樣口進(jìn)行憋壓測試和流量測試。
2、柱箱升溫前必須加載氣
不加載氣就給柱子升溫,恐怕是對柱子造成性損壞的“手法”,由此會造成嚴(yán)重的固定相流失,柱子基本就不能用了。
除此之外,確保柱箱冷卻后再關(guān)閉載氣,原因同上。
這里有個小技巧:
在關(guān)閉柱箱溫度之前,將柱溫設(shè)置為35°C,柱箱風(fēng)扇在溫度降下來之前一直在工作,這樣可以更快冷卻。如果只是關(guān)閉溫度,風(fēng)扇停止工作,降溫相對慢一些。
不通載氣除了會對柱子會有損傷,對檢測器也會造成一定的破壞,比如對TCD的熱絲,如果高溫下被氧化就很容易斷,再比如柱子流失對ECD的池體和陽極造成污染等。
3、仔細(xì)準(zhǔn)確地編輯柱子參數(shù)
大伙兒都知道需要編輯的柱子參數(shù)有長度,內(nèi)徑和膜厚。
無論是通過機(jī)械背壓閥維持穩(wěn)定的柱頭壓力也罷,還是大多數(shù)現(xiàn)代氣相色譜儀都具備電子控制流路,柱子流量都是通過在溫度和參數(shù)基礎(chǔ)上精準(zhǔn)控制計算出來的。
每次更換色譜柱需確保將正確的尺寸輸入到GC中,否則后續(xù)計算的流速和分流比等流路控制的關(guān)鍵數(shù)據(jù)將出現(xiàn)很大偏差。這樣柱流量直接影響保留時間定性出偏差,而分流比偏差直接影響響應(yīng)峰面積。
4、選擇與載氣類型對應(yīng)的流量
每種載氣具有的線速度,從而獲得分離效率:
氮氣12cm / sec,氦氣35cm / sec和氫氣40-50cm / sec
為了獲得該線速度,流量是與相應(yīng)色譜柱的參數(shù)必須是匹配的。
例如對于使用氦氣的0.32mm內(nèi)徑的色譜柱,流量約為2.0ml /min。
如果未選擇流量,則柱效會明顯降低。
5、選擇合適的襯管類型
當(dāng)液態(tài)樣品注入氣相進(jìn)樣口時,會氣化為更大體積的氣態(tài)。
氣化后樣品氣態(tài)體積的大小取決于所使用的溶劑和進(jìn)樣量。
如果這個體積超過了襯管的內(nèi)部尺寸,就會出現(xiàn)樣品反沖和樣品峰嚴(yán)重拖尾的情況。
即便采取高的分流比也無法降低這種影響,你必須采取減少進(jìn)樣量,使用不同的溶劑或使用更大的襯管的方法。
6、明確恒流/恒壓模式
隨著柱溫箱程序升溫,色譜柱內(nèi)壓力升高。
在恒壓系統(tǒng)中,儀器將流量相應(yīng)減少以保持恒定的柱頭壓。這樣做會推后保留時間,并因流量偏離了線速度而降低效率。
在恒流模式下,儀器通過增加壓力來保持恒定柱流速(具有線速度)。保留時間更短,效率更高。
恒定壓力和恒定流量兩種模式會產(chǎn)生兩種不同的保留時間和峰形。因此運行前設(shè)定好哪種模式會直接影響結(jié)果。
7、避免水分進(jìn)入到非極性柱
對于某些樣品類型,可能無法避免將水分帶入到柱子中, 因此需要確保您使用的色譜柱可以允許水分進(jìn)入。
有些色譜柱,隨著柱子逐漸變得非極性,,不再對水有吸附,進(jìn)而不再具有分離能力。
所以對于水分相關(guān)進(jìn)樣,盡可能使用固定相極性的,并要接受色譜柱壽命減少和柱流失增加的結(jié)果。
色譜柱是否耐水,要仔細(xì)查看色譜柱上的說明,比如標(biāo)明:不推薦使用水,或者標(biāo)明耐水等等。
8、正確選擇點火所需氣體流量比例
(1)請注意點火期間關(guān)閉尾吹氣。
(2)氫氣與空氣之間流量的比例按照廠商建議,或者使用1:10的常規(guī)比例,如30ml/min的氫氣流量加300ml/min的空氣流量。
(3)請?zhí)貏e注意,設(shè)定之后如有條件用流量計測量一下設(shè)定流量。
(4)點火成功后逐步增加尾吹氣流量。
9、注意色譜柱的存放
(1)色譜柱的固定相容易氧化,務(wù)必在存放時先通入惰性氣體后密封兩端以防止空氣進(jìn)入柱子。
(2)同時將色譜柱存儲在柱盒中并放置在陰暗處,避光。
10、做好氣源監(jiān)測
多數(shù)情況下氣瓶與實驗室有一定的距離。對氣體鋼瓶使用情況的記錄與監(jiān)測十分必要。
系統(tǒng)出現(xiàn)問題時首先需要引起注意的便是檢查氣源是否正常。
如大家所見,在氣相色譜的使用和維護(hù)過程中,很多好習(xí)慣都涉及到了相關(guān)耗材的定期更換,這樣才能保證色譜儀器的長期穩(wěn)定的運行,以及試驗結(jié)果的可靠性。
文章來源:色譜學(xué)堂