了解如何消除色譜偽峰
色譜偽峰給色譜分析工作帶來(lái)了極大的干擾和影響。為解決這個(gè)問題,首先必須弄清楚產(chǎn)生偽峰的原因。
的情形是所用的流動(dòng)相在檢測(cè)波長(zhǎng)下有吸收,而進(jìn)在此波長(zhǎng)下沒有吸收的溶劑,在流動(dòng)相中會(huì)出現(xiàn)“洞穴”,通過(guò)色譜柱后出倒峰。
至于偽峰產(chǎn)生的原因,可作如下解釋:
通常樣品(X)和流動(dòng)相(M)間可能存在兩種作用——協(xié)同的吸著作用和競(jìng)爭(zhēng)的吸著作用。
假設(shè)樣品分子X不可檢測(cè)(無(wú)紫外吸收),流動(dòng)相組分M可檢測(cè)。M常是流動(dòng)相中的雜質(zhì),而X可能是溶解樣品溶劑中的雜質(zhì)或組分,或者是真實(shí)的樣品組分。在協(xié)同吸著作用下,如果tM小于tX,流動(dòng)相組分首先離開柱,則M以倒峰先離開柱,接著X出正峰;如果M和X的保留時(shí)間相反,即tM大于tX,則X先離開柱出倒峰,后流出的M出正峰。
在離子對(duì)色譜中是以協(xié)同吸著作用為模式。在反相或正相色譜中是競(jìng)爭(zhēng)而不是協(xié)同,結(jié)果引起不同形式的偽峰:先出的偽峰是正峰,后出的偽峰是倒峰。
一旦出現(xiàn)了偽峰,可考慮用下面幾種思路予以糾正:
(1)用純?cè)噭┳髁鲃?dòng)相。以高質(zhì)量的離子對(duì)試劑和緩沖物質(zhì)配制流動(dòng)相,各類試劑加和起來(lái)應(yīng)產(chǎn)生小的偽峰效應(yīng)。
(2)用流動(dòng)相溶解樣品。以其它溶劑溶解樣品可能產(chǎn)生偽峰或?qū)е聜畏宓漠a(chǎn)生,用流動(dòng)相溶解樣品可減少產(chǎn)生偽峰的幾率。
(3)進(jìn)小體積的樣品溶液。偽峰常與樣品體積成比例,離子對(duì)色譜的進(jìn)樣體積要低于50微升。
(4)預(yù)處理好樣品。樣品中的雜質(zhì)會(huì)促成偽峰的出現(xiàn)。
若用上述方法還不能去掉偽峰,則可視作為特殊的干擾峰來(lái)處理,即作為特殊的組分。改變色譜條件,使偽峰位置發(fā)生變化,避開被干擾的峰。