氣相色譜法測(cè)定麝香祛痛搽劑中麝香酮的研究
麝香祛痛搽劑原收載于《中國(guó)藥典》2005年版Ⅰ部,根據(jù)2010年版《中國(guó)藥典》計(jì)劃任務(wù)表要求,本文將處方中的麝香修訂為人工麝香,因?yàn)槿斯晗銥橘F重藥材,所以應(yīng)對(duì)麝香祛痛搽劑中人工麝香制訂質(zhì)量控制方法,本文采用氣相色譜法對(duì)處方中的人工麝香藥材進(jìn)行定性鑒別,供試品中各組分出峰時(shí)間較合適,分離效果較好,而且各組分對(duì)應(yīng)的峰面積和理論踏板數(shù)均較高,同時(shí)更能保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性、準(zhǔn)確性、重復(fù)性,陰性無干擾,專屬性強(qiáng),結(jié)果較滿意。
1 儀器與試藥
氣相色譜儀GC9890B型(FID檢測(cè)器);SD色譜工作站; SD彈性石英毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.25 mm,膜厚度0.25 μm);聚乙二醇(PEG)-20M毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.32 mm,膜厚度0.5 μm);麝香祛痛搽劑樣品: 武漢馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司產(chǎn)品(批號(hào)080402,080403,080413),襄樊隆中藥業(yè)有限責(zé)任公司產(chǎn)品(批號(hào)080101,080201,080401),紹興華通制藥有限公司產(chǎn)品(批號(hào)C03A0753,C03A0809),李時(shí)珍醫(yī)藥集團(tuán)有限公司產(chǎn)品(批號(hào)2009020001)。麝香酮對(duì)照品,中國(guó)藥品生物制品研究所產(chǎn)品(批號(hào)110719-200512);無水乙醇為分析醇。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件色譜柱為SD彈性石英毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.25 mm,膜厚度0.25 μm);聚乙二醇(PEG)-20M毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.32 mm,膜厚度0.5 μm);柱溫:程序升溫:初溫130℃,保持5 min后,每分鐘升高0.8℃至180℃,保持2 min后,再以每分鐘升高20℃至220℃保持5 min; 檢測(cè)器為FID檢測(cè)器;檢測(cè)器溫度:250℃; 進(jìn)樣口溫度220℃;流速1.0 ml/min; 理論板數(shù)按麝香酮計(jì)算應(yīng)不低于20 000。
2.2 色譜條件的確定
2.2.1 色譜柱的確定取供試品(紹興華通制藥有限公司,批號(hào):C03A0753)按供試品制備方法制備得供試品溶液,用聚乙二醇(PEG)-20M毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.32 mm,膜厚度0.5 μm)進(jìn)樣。結(jié)果表明,用聚乙二醇(PEG)-20M毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.32 mm,膜厚度0.5 μm)能收獲較好的分離效果,得到準(zhǔn)確高效的分析結(jié)果。故選用:聚乙二醇(PEG)-20M毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.32 mm,膜厚度0.5 μm)。
2.2.2 程序升溫條件的確定將“2.3.1”項(xiàng)下制得供試品溶液按程序升溫:初溫130℃,保持3 min后,每分鐘升高1.5℃至180℃,再以每分鐘升高20℃至220℃保持5 min;流速1 ml/min。結(jié)果表明,在該方案下,供試品中各組分出峰時(shí)間較合適,分離效果較好,而且各組分對(duì)應(yīng)的峰面積和理論踏板數(shù)均較高。
通過試驗(yàn),確定色譜條件為:色譜柱:聚乙二醇(PEG)-20M毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.32 mm,膜厚度0.5 μm);檢測(cè)器為FID檢測(cè)器;進(jìn)樣器溫度:220℃;檢測(cè)器溫度:250℃;分流進(jìn)樣(分流比1∶1);程序升溫:初溫130℃,保持5 min后,每分鐘升高0.8℃至180℃,保持2 min后,再以每分鐘升高20℃至220℃保持5 min;流速1 ml/min;進(jìn)樣量:1 μl。
2.3 溶液的制備
2.3.1 供試品溶液的制備針對(duì)麝香酮的脂溶性,采用石油醚(30~60℃)提取的方法,這樣組分的轉(zhuǎn)移率較高,同時(shí)操作簡(jiǎn)便。但是因?yàn)楸酒拂晗阃奶幏搅窟^低;必須進(jìn)行富集的過程。因?yàn)闃悠窞?0%的乙醇制劑,與石油醚(30~60℃)會(huì)發(fā)生混溶,因此加入4倍量的水,再置于分液漏斗中用石油醚(30~60℃)提取2次,100 ml/次,石油醚(30~60℃)液自然揮干,可使麝香酮成分不會(huì)損失。
取本品50 ml,加水200 ml,搖勻。置于分液漏斗中,用石油醚(30~60℃)提取2次,100 ml/次。合并石油醚,自然揮干。殘?jiān)脽o水乙醇2 ml溶解,取上清液作為供試品溶液。
2.3.2 對(duì)照品溶液的制備取麝香酮對(duì)照品,加無水乙醇制成每毫升含0.1 mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
2.3.3 陰性對(duì)照溶液的制備按處方量制備不含麝香酮的陰性樣品,按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。
2.4 專屬性考察取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液,分別依法測(cè)定。在該色譜條件下,在與麝香酮對(duì)照品保留時(shí)間相同的位置不出現(xiàn)色譜峰,表明其他成分對(duì)麝香酮的測(cè)定無干擾。結(jié)果見圖1~3。
2.5 樣品測(cè)定按正文所述方法,對(duì)各廠家各批次樣品進(jìn)行檢驗(yàn),結(jié)果均呈正結(jié)果。
3 討論
因?yàn)轺晗阃哂兄苄?,采用石油?30~60℃)提取的方法,這樣組分的轉(zhuǎn)移率較高,同時(shí)操作簡(jiǎn)便。但是因?yàn)楸酒拂晗阃奶幏搅窟^低,必須進(jìn)行富集的過程。因?yàn)闃悠窞?0%的乙醇制劑,與石油醚(30~60℃)會(huì)發(fā)生混溶,因此加入4倍量的水,再置于分液漏斗中用石油醚(30~60℃)提取,可使麝香酮成分不會(huì)損失。但是富集后導(dǎo)致雜質(zhì)峰較多,用平溫或較快的升溫速率均達(dá)不到較好的分離效果,因此經(jīng)過摸索將升溫速率定為每分鐘升高0.8℃,在該方案下,供試品中各組分出峰時(shí)間較合適,分離效果較好,而且各組分對(duì)應(yīng)的峰面積和理論踏板數(shù)均較高,同時(shí)更能保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性、準(zhǔn)確性。